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FUTURE FOOD TECHNOLOGY
通過通過全球研究，發(fā)現(xiàn)感官設(shè)計的未來！
我們致力于推動未來食品技術(shù)和創(chuàng)新！
上海瑞智能科技有限公司是致力于食品感官分析及感官智能儀器、感官分析軟件代理和銷售
以及技術(shù)服務(wù)和技術(shù)支持的專業(yè)公司。
同時，引入全新設(shè)備，如：體外模擬消化設(shè)備脈沖光電殺菌設(shè)備等，
致力于為廣大高校師生提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)。
分析影響不同牧場牛奶風(fēng)味感官差異的方法
近年來規(guī)模化牧場已成為生產(chǎn)主體，牛奶的規(guī)?；a(chǎn)能夠保證奶牛、飼料、技術(shù)等的一致性，但不同地區(qū)的環(huán)境因素仍會造成牛奶中脂肪、蛋白質(zhì)等品質(zhì)指標(biāo)存在差異，進(jìn)而導(dǎo)致不同牧場牛奶之間的風(fēng)味差異。牛奶風(fēng)味是決定消費(fèi)者購買與否的重要因素之一。目前關(guān)于牛奶風(fēng)味的研究大多集中在不同殺菌方式的比較方面，對于不同地區(qū)牧場牛奶風(fēng)味差異的研究較少。
本研究以4個不同感官特性牧場的牛奶為研究對象，采用CATA法、GC-MS以及GC-MS-O聯(lián)用技術(shù)研究了牛奶的感官特征和揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)。采用單因素方差分析、對應(yīng)分析（CA）和偏最小二乘回歸（PLSR）等方法，分析影響不同牧場牛奶感官差異的香氣活性化合物，以期為實(shí)際乳品工業(yè)中的牛奶感官品質(zhì)的控制提供進(jìn)一步的理論參考。
一、材料與方法
01 材料與試劑
從河北的6個牧場獲取6份牛奶樣品，通過初步感官評價（數(shù)據(jù)未顯示）篩選出4種感官差異較大的牛奶樣品，分別標(biāo)記為一牧、二牧、三牧、四牧（表1）。
02 揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的提取
利用SPME-Arrow萃取頭進(jìn)行風(fēng)味化合物的萃取，并對提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。經(jīng)優(yōu)化后的條件：10g樣品置于40mL的頂空瓶中，向其中加入1g氯化鈉提高萃取效率，并向其中添加1μL質(zhì)量濃度為0.816mg/mL的2-甲基-3-庚酮作為內(nèi)標(biāo)。在45℃水浴鍋中平衡20min后，利用SPME-Arrow的萃取頭吸附30min，在GC-MS中解吸5min。
03 GC-MS條件
色譜條件：DB-WAX型毛細(xì)管柱（60m×0.25mm，0.25?μm），以氦氣作為載氣，設(shè)置恒定流速1.2mL/min。升溫程序：起始柱溫為40℃，以4℃/min升溫到230℃，維持2min。采用不分流模式。
質(zhì)譜條件：電子電離（electronionization，EI）源，電子能量70eV；進(jìn)樣口溫度250℃，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃；全掃描模式，質(zhì)量掃描范圍m/z35～350。
04 GC-MS-O條件
采用配備嗅覺檢測端口的GC-MS。高純氮?dú)猓?9.99%）作為GC-O分析的載氣。嗅聞口與質(zhì)譜儀進(jìn)樣分流比1∶1，嗅聞口和傳輸線的溫度分別保持在230℃和250℃，在檢測口通入濕潤的空氣。其他條件同1.3節(jié)GC-MS條件。由4名有牛奶感官經(jīng)驗(yàn)的小組成員進(jìn)行，針對牛奶香氣物質(zhì)對評價員進(jìn)行額外12h培訓(xùn)（每周3h，共4周）。嗅聞時，實(shí)時記錄香氣化合物出現(xiàn)的時間、氣味特征以及氣味強(qiáng)度（aromaintensity，AI）。參考文獻(xiàn)方法并進(jìn)行調(diào)整，將AI分5個等級，分別以0、1、2、3、4分的形式表示香氣強(qiáng)度，“0”表示未識別到任何氣味，“1”表示可以準(zhǔn)確識別氣味但持續(xù)時間短，“2”表示能快速識別氣味且持續(xù)時間長，“3”表示能準(zhǔn)確快速識別氣味且持續(xù)時間較長，“4”表示能準(zhǔn)確快速識別氣味且持續(xù)時間更長。如果2個及其以上的小組成員感知到氣味，就確定一個香氣活性物質(zhì)。
05 定性定量分析
采用NIST14譜庫、計算化合物的保留指數(shù)（retentionindex，RI）與文獻(xiàn)中的保留指數(shù)進(jìn)行對比以及比對嗅聞結(jié)果對牛奶中化合物進(jìn)行定性分析。RI計算：將正構(gòu)烷烴C7～C30與牛奶在相同的色譜條件下得出GC保留時間，根據(jù)公式計算待測物i的RI（tn＜ti＜tn＋1）：
式中：n為碳原子數(shù)；tn為碳原子數(shù)為n的正構(gòu)烷烴的保留時間；tn＋1為碳原子數(shù)為n＋1的正構(gòu)烷烴的保留時間；ti為樣品i的保留時間。
定量分析：內(nèi)標(biāo)半定量法，根據(jù)化合物及內(nèi)標(biāo)化合物峰面積比值計算各揮發(fā)性組分的濃度。對嗅聞得到的香氣活性物質(zhì)進(jìn)行內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法（內(nèi)標(biāo)為2-甲基-3-庚酮）精確定量。
06 感官評價
從北京工商大學(xué)學(xué)生中招募到50名未經(jīng)培訓(xùn)的消費(fèi)者（18名男性和32名女性，年齡19～25歲）完成CATA問卷（圖1）。實(shí)驗(yàn)開始前，每個參與者都簽署了一份知情同意書，參與者均具有長期飲用牛奶的習(xí)慣（每周至少5次）。并對招募的消費(fèi)者評價員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所需的流程介紹以及感官評價等基本知識培訓(xùn)。
CATA問卷中的感官屬性在文獻(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室感官評價專家小組討論確定的基礎(chǔ)上，再由10名消費(fèi)者集體討論，根據(jù)樣品本身的屬性以及參與者的語言習(xí)慣對描述詞進(jìn)行調(diào)整后最終確定。在回答完每個評估樣本的CATA問題后，參與者還需要使用1～9分的享樂量表對樣品的總體喜愛程度進(jìn)行評分。
將4份15mL的牛奶樣品置于30mL的品評杯中。樣本隨機(jī)3位數(shù)編碼呈送給參與者。期間還提供了無鹽餅干和瓶裝凈水清潔口腔。
07 數(shù)據(jù)處理
采用單因素方差分析比較GC-MS測得的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的半定量及精確定量結(jié)果，并采用Tukey事后比較法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析（以P＜0.05表示差異顯著）。CATA數(shù)據(jù)以感官屬性的頻率表示，通過具有顯著差異的氣味描述詞進(jìn)行CA，將氣味屬性的頻率和4個牛奶樣本之間的相關(guān)性可視化。使用PLSR，以探索CATA氣味感官屬性（頻率）與香氣活性物質(zhì)之間的關(guān)系。利用IBMSPSSStatistics23、SIMCA14及Origin2018等軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及圖像繪制。
